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| 多肽合成 |
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北京奥科生物于2000年初开始推出多肽合成服务,至2002年底,我们已为国内科研工作人员合成了数千条高纯度肽链,广泛应用于蛋白组学各研究领域.
我们提供的最终结果都附有HPLC分析、质谱分析报告,您可以放心使用.
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| 服务流程 |
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1、 客户提供所需合成的肽段(可通过e-mail或传真方式)
2、 经本公司确认后,与客户签定委托合同同时提交款项。
3、 款项到达公司帐户之日起,定单生效(6000元以下的货款,需付全款;6000元以上的货款,需预付总款项的70%)
4、 结果提交给客户,同时交付HPLC分析、质谱分析报告。
5、 预付部分货款的客户在收到产品后的10天内付清合同规定的剩余款项。
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| 产品报价 |
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| 每个残基收费标准(元) |
| 序列长度(残基数) |
产量( mg ) |
纯 度 |
| 脱盐 |
85% |
90% |
95% |
98% |
| 8 — 20 |
5-10mg |
78 |
143 |
169 |
182 |
273 |
| 11-20mg |
85 |
156 |
186 |
202 |
299 |
| 21-30mg |
100 |
180 |
300 |
243 |
358 |
| 31-40mg |
125 |
234 |
281 |
312 |
460 |
| 41-50mg |
135 |
254 |
305 |
338 |
500 |
| 51-75mg |
173 |
364 |
455 |
501 |
737 |
| 76-100mg |
186 |
390 |
488 |
537 |
790 |
| 21-30 |
5-10mg |
91 |
165 |
195 |
210 |
315 |
| 11-20mg |
104 |
182 |
215 |
232 |
345 |
| 21-30mg |
117 |
208 |
263 |
280 |
411 |
| 31-40mg |
143 |
270 |
322 |
360 |
530 |
| 41-50mg |
156 |
292 |
351 |
390 |
575 |
| 51-75mg |
200 |
419 |
524 |
576 |
848 |
| 76-100mg |
215 |
450 |
560 |
618 |
910 |
| 30 以上 (请咨询) |
5-10mg |
98 |
180 |
212 |
228 |
342 |
| 11-20mg |
110 |
202 |
233 |
252 |
375 |
| 21-30mg |
125 |
225 |
286 |
305 |
448 |
| 31-40mg |
156 |
293 |
351 |
390 |
576 |
| 41-50mg |
169 |
317 |
381 |
422 |
624 |
| 51-75mg |
216 |
455 |
570 |
625 |
922 |
| 76-100mg |
233 |
488 |
610 |
671 |
988 |
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相关说明:
1、表格中所列价格中已包括HPLC纯化。
2、从定单生效之日起,交货时间3-6周(相应不同规格,交货期不一样)。
3、限于篇幅,只列出常规合成报价,若有更大产量或特殊标记(如同位素、荧光等)需求,敬请致电垂询。
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| 多肽合成技术资料 |
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多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程,合成一般从C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的。现在多采用固相合成法,从而大大的减轻了每步产品提纯的难度。为了防止副反应的发生,合成柱和添加的氨基酸的侧链都是被保护的。羧基端是游离的,并且在反应之前必须活化。化学合成方法有两种,即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很 多优势,现在大多采用Fmoc法合成。
◎ 多肽的溶解
大多数肽的首选溶剂是超纯抽气水。稀乙酸或氨水分别对于碱性或酸性多肽的溶解很重要。这些方法不溶的多肽, 需要DMF、脲、guanidiniam chloride或acetonitnle来溶解,这些溶剂可能某些实验有副作用。所以我们建议设计多肽时要加注意。
残基Ala, Cys , Ile, Leu, Met, Phe和Val将全增加多肽的溶解难度。
◎ 多肽的保存
多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。
对于含Cys, Met orTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽可易空气氧化, 在封瓶前,慢慢流过多肽的氮气或氩气也会降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有这些肽与不含这些有问题解苷的那些肽相比,生命期有限。
◎ 多肽的定量
包装 1mg或更少的多肽按净重包装,声明的小瓶重不含相关抗离子和水。 例如,氨基酸分析决定的肽含量是80%, 在1mg样品中,那么瓶中毛重是1.25mg。大量的多肽以毛重算。标出的重量含相关抗离子和水, 例如,25mg样品中肽百分比为90%,那么,实际肽量为25mg×90%=22.5mg
不要把肽含量和纯度搞混了。肽的纯度可能是100%, 而肽含量相关带电基团(如Arg, Lys )的抗离子量和肽亲水性决定。这是合成肽的本身特性。
◎ HPLC分析和纯化
分析HPLC使用柱子和泵系统,可以经受传递高压,这样可以用极细的微粒(3-10μ m)做填料。由此多肽要在几分钟内高度被分析。
HPLC分两类:离子交换和反相。 离子交换HPLC依靠多肽和固相间的直接电荷相互作用。柱子在一定PH范围带有特定电荷衍变成一种离子体,而多肽或多肽混合物,由其氨基酸组成表现出相反电荷。 分离是一种电荷相互作用,通过可变PH, 离子强度, 或两者洗脱出多肽,通常, 先用低离子强度的溶液,以后逐渐加强或一步一步加强,直到多肽火柱中洗脱出。离子交换分离的一个例子使用强阳离子交换柱。如sulfoethylaspartimide通过酸性PH中带正电来分离。
反相HPLC条件与正常层析正相反。多肽通过疏水作用连到柱上,用降低离子强度洗脱, 如增加洗脱剂的疏水性。通常柱子由共价吸附到硅上的碳氢烷链构成,这种链长度为G4-G8碳原子。 由于洗脱是一种疏水作用。长链柱比短链对小的, 高带电肽好。另一方面大的疏水肽用短链柱洗脱好。 然而,总体实践中, 这两类柱互变无多少显著差别,别类载体由碳水化合物构成, 比如苯基。
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